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土壤總磷/有機(jī)磷/無(wú)機(jī)磷含量測(cè)定試劑盒（VW13, 50T/24S）說(shuō)明書(shū)
測(cè)定意義：
土壤總磷包括有機(jī)磷和無(wú)機(jī)磷，其中無(wú)機(jī)磷能夠直接被植物利用。土壤有機(jī)磷經(jīng)過(guò)礦化分解
而轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)磷。同時(shí)測(cè)定土壤總磷、有機(jī)磷和無(wú)機(jī)磷，可以全面反映土壤磷營(yíng)養(yǎng)狀況。
測(cè)定原理：
利用鉬藍(lán)法定磷。取一份土樣，通過(guò)浸提法測(cè)定土壤無(wú)機(jī)磷含量；另外取一份土樣，經(jīng)高溫
灼燒后，土壤有機(jī)磷轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)磷，測(cè)得土壤總磷含量；總磷含量減去無(wú)機(jī)磷含量，即可計(jì)
算出有機(jī)磷含量。
自備儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式水浴鍋，分析天平、可調(diào)式移液器、550℃高溫電爐，
1mL 玻璃比色皿、蒸餾水、100 目篩子（可更小）。

土壤總磷/有機(jī)磷/無(wú)機(jī)磷含量測(cè)定試劑盒
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。臨用前用蒸餾水稀釋10 倍后再用。
試劑二：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前配制，加入20 mL 蒸餾水，充分溶解后加入10 mL
試劑二，混勻。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1 支，20 μ mol/L 無(wú)機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)品，4℃保存。
土壤不同形態(tài)磷提取：
1.無(wú)機(jī)磷：稱(chēng)取通過(guò)100 目篩子的風(fēng)干土樣0.1g，轉(zhuǎn)移到10 mL 離心管，加入10mL 試劑一，
震蕩混勻，然后置于45℃水浴1h，8000rpm，離心10min，取上清液一，用于無(wú)機(jī)磷含量測(cè)
定。
2.總磷提取：取通過(guò)100 目篩子的風(fēng)干土樣，550℃灼燒1h，冷卻后稱(chēng)取約0.1g，轉(zhuǎn)移到10
mL 離心管，加入10mL 試劑一，震蕩混勻，然后置于45℃水浴1h，8000rpm，離心10min，
取上清液二，用于總磷含量測(cè)定。
測(cè)定步驟：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到660 nm，蒸餾水調(diào)零。
2.打開(kāi)水浴鍋，調(diào)節(jié)溫度到40℃。
3. 空白管：取EP 管，依次加入500μL 蒸餾水，500μL 試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫
10min，室溫冷卻10 min 后于660 nm 測(cè)定吸光度，記為A 空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP 管，依次加入50μL 標(biāo)準(zhǔn)液，450μL 蒸餾水，500μL 試劑三，混勻后置于
40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min 后于660 nm 測(cè)定吸光度，記為A 標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 測(cè)定管：取EP 管，依次加入50μL 上清液一或者上清液二，450μL 蒸餾水，500μL 試劑
三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min 后于660 nm 測(cè)定吸光度，記為A
測(cè)定管。
土壤磷含量計(jì)算：
1.土壤無(wú)機(jī)磷含量（μmol /g）=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測(cè)定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)]×V
總÷W=0.2×(A 測(cè)定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)÷W
C 標(biāo)準(zhǔn)液：20 μmol/L； W：土壤樣品質(zhì)量，g； V 總：上清液一總體積，10 mL=0.01 L。
2.土壤總磷含量（μmol /g）=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測(cè)定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)]×V 總
÷W=0.2×(A 測(cè)定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)÷W
C 標(biāo)準(zhǔn)液：20 μmol/L；V 標(biāo)準(zhǔn)液：50μL=0.05 mL；W：土壤樣品質(zhì)量，g；V 總：上清液二
總體積，10 mL=0.01 L。
3. 土壤有機(jī)磷（μmol /g）=土壤總磷-土壤無(wú)機(jī)磷

土壤總磷/有機(jī)磷/無(wú)機(jī)磷含量測(cè)定試劑盒