總超氧化物歧化酶(SOD)（檢測服務(wù)）

服務(wù)介紹：

有氧化物質(zhì)存在下核黃素被光還原，在有氧條件下，被還原的核黃素極易再氧化產(chǎn)生超氧陰離子自由基(O2-)，O2-可將氮藍(lán)四唑還原為藍(lán)色的甲腙，后者在560nm處有強(qiáng)吸收，而SOD可清除超氧陰離子(O2-)，從而抑制了甲腙的形成。于是光還原反應(yīng)后，反應(yīng)液藍(lán)色愈深，說明SOD活性愈低，反之酶活性愈高，據(jù)此通過酶標(biāo)儀比色分析就可以計(jì)算出樣品中總超氧化物岐化酶活性水平。本方法是利用SOD抑制NBT在光照下的還原作用來確定酶活性大小，可用于檢測植物、組織、細(xì)胞、血清或其它樣品中SOD活性。

背景介紹：

超氧化物歧化酶（SOD）能夠催化超氧陰離子自由基歧化生成氧和過氧化氫，是生物體內(nèi)最重要的自由基清除劑之一。根據(jù)其金屬輔基的不同，SOD大致可分為三類：Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和Fe-SOD。

1、Cu/Zn-SOD：呈藍(lán)綠色，主要存在于真核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，被認(rèn)為存在于比較原始的生物類群中且分布最-廣的一種。

2、Mn-SOD：呈粉紅色，主要存在于原核生物和真核生物的線粒體中。

3、Fe-SOD：呈黃褐色，主要存在于原核細(xì)胞中。

作用與功能：

1、抗氧化與抗衰老：SOD能夠清除和減少人體內(nèi)過多的自由基，避免其對(duì)細(xì)胞過度的損傷，具有抗氧化和抗衰老的作用。

2、預(yù)防心血管疾病：SOD能夠清除有害的自由基，改善血脂異常，預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化，從而預(yù)防心血管疾病的發(fā)生。

3、預(yù)防腫瘤發(fā)生：SOD可以清除自由基，從而預(yù)防腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，還可以緩解放化-療產(chǎn)生的副作用。

4、抗炎作用：SOD具有抗炎作用，能夠減輕炎癥反應(yīng)，緩解疼痛，對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等炎癥性疾病具有一定的治療作用。

5、增強(qiáng)免疫力：SOD能夠提高機(jī)體的免疫力，通過清除自由基，降低氧化應(yīng)激，促進(jìn)免疫細(xì)胞的增殖和活化，提高機(jī)體的抵抗力

操作步驟（僅供參考）：

(1)  樣本接收：血清、血漿、透明液體狀樣本、組織勻漿、植物等

(2)實(shí)驗(yàn)步驟：

1.準(zhǔn)備SOD標(biāo)準(zhǔn)品：將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度：200、100、50、20、10、5、2U/ml，各取20μl參考樣品進(jìn)行檢測。

2.選取合適的光源：在光照培養(yǎng)箱或日光燈下，用光度儀測定光度值為3500~4000Lx的適合光照反應(yīng)的位置，做出標(biāo)記。

3.配制NBT工作液：將Met緩沖液與NBT溶液按23:3的比例混合。

4.SOD加樣：用96孔板設(shè)置空白對(duì)照孔、光照對(duì)照孔、測定孔，在低光強(qiáng)條件下加入待測樣品和其它各種溶液，加入FD溶液后充分混勻。

5.SOD測定:混勻，取空白對(duì)照孔置于暗處，其他各孔置于4000Lx日光下反應(yīng)20min；反應(yīng)結(jié)束后，以不照光的空白對(duì)照孔調(diào)零，用酶標(biāo)儀測定560nm處吸光度。

送樣須知：

1.南京和上海地區(qū)的客戶可提供上門取樣服務(wù)，提前一天聯(lián)系

2.外地客戶可郵寄樣本，樣本運(yùn)輸應(yīng)符合一般的生物學(xué)要求，密封加冰袋或者干冰運(yùn)輸

3.若細(xì)胞、血清、組織樣本具有潛在的傳染性或致病性，請(qǐng)務(wù)必提前告知

4.測試結(jié)束提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告后，樣本可以保留1個(gè)月，若需保留樣本或者回收樣本請(qǐng)?zhí)崆案嬷?/span>

備注：本公司對(duì)客戶的項(xiàng)目的專有技術(shù)和資料（包括實(shí)驗(yàn)方案，測試結(jié)果，樣本等）負(fù)有絕對(duì)保密的責(zé)任。

僅供科研實(shí)驗(yàn)用，不做其他用途！

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